Elektroforese is de term die wordt gebruikt voor de studie van de manier waarop geladen deeltjes door een medium bewegen bij blootstelling aan een elektrisch veld. De deeltjes zullen met verschillende snelheden door de gel reizen, afhankelijk van de lading gedragen door het deeltje en de grootte van het deeltje dat door het enigszins beperkende medium moet dringen. Het medium is opzettelijk restrictief gemaakt, zodat de deeltjes een patroon in het medium vormen dat kan worden geanalyseerd wanneer het elektrische veld wordt verwijderd. Deze techniek is waardevol in medisch onderzoek om RNA, DNA en eiwitten te scheiden op basis van hun mogelijkheden om door de gel te bewegen. Gebruik deze tips om te leren hoe u een elektroforesegel maakt.

Stappen

  1. 1 Vind de vereiste gelconcentratie. Dit moet worden gespecificeerd door de arts en zal variëren op basis van het type onderzoek dat vereist is door de studie die de arts uitvoert. Gemeenschappelijke concentraties zijn 0,7 procent. 0,8 procent, 1,0 procent en 1,2 procent.
  2. 2 Zorg voor een elektroforese-gietbak voor gel. Deze trays zijn verkrijgbaar bij medische voedingswinkels. Noteer het volume van de lade omdat deze de maximale hoeveelheid elektroforesegel zal bepalen die tegelijkertijd kan worden gemaakt.
  3. 3 Verzamel de vereiste chemicaliën. Verkrijg een hoeveelheid Tris-Acetate-EDTA (TAE) die voldoende is om het volume van de gemaakte gel te bepalen. De hoeveelheid agarose, het polymeer dat de gel vormt, zal afhangen van de concentratie van de te maken gel. Het uitgedrukte gelpercentage is agarose in grammen gedeeld door TAE in ml. Het uiteindelijk benodigde ingrediënt is ethidiumbromide (EtBr). EtBr maakt DNA zichtbaar onder ultraviolet licht. Verdeel de hoeveelheid TAE die door 1000 is gebruikt om de benodigde hoeveelheid EtBr te bepalen.
  4. 4 Voeg de agarose toe. Voeg de bepaalde hoeveelheid agarose toe aan de vereiste hoeveelheid TAE. Roer of roer het mengsel voorzichtig om te zorgen voor een goede menging.
  5. 5 Bereid het mengsel voor. De agarose in TAE moet worden verwarmd in een magnetron om het op te lossen. Verwarm de oplossing gedurende korte tijd, zoals 15 seconden, op een laag vermogen. Controleer de voortgang van het smelten constant. Als de TAE wordt opgewarmd tot het punt waarop deeltjes worden gevormd, is de batch geruïneerd.
  6. 6 Voeg de EtBr toe. EtBr is een krachtig biohazard. Voor dit deel van het proces moeten laboratoriumhandschoenen worden gedragen. Voeg de EtBr toe nadat de verwarming van de TAE is voltooid. Roer of roer de container voorzichtig om te zorgen voor een goede menging. Laat de vloeistof 5 minuten staan ​​en afkoelen.
  7. 7 Vul de gietladen. Wervel of roer het chemische mengsel om ervoor te zorgen dat er een gelijkmatige temperatuur door het mengsel heen is. Giet het mengsel voorzichtig in de gietplaat.
  8. 8 Plaats de kammen. Plaats de gietkammen in de steunrails van de gietlade. De kamtanden zullen putjes creëren in de gel waaraan het te testen monster kan worden toegevoegd. De kammen zijn er in verschillende maten om putten van verschillende afmetingen te maken. De putjes die moeten worden gevormd, worden door de arts bepaald op basis van de uit te voeren studie.
  9. 9 Laat de gietplaten afkoelen en laat de gel 1 uur staan. Verwijder de gietkammen. Verwijder de gel uit de gietlade. De elektroforesegel is nu klaar voor gebruik.