Pipetten zijn een soort laboratoriumapparatuur die wordt gebruikt voor het meten en overbrengen van zeer kleine hoeveelheden vloeistof. Nauwkeurigheid en precisie bij het meten van de pipet zijn noodzakelijk, aangezien elk verschil in de afgegeven hoeveelheid de resultaten van een experiment kan beïnvloeden. Om nauwkeurigheid te garanderen, moet u de pipetkalibratie om de paar maanden controleren. Het kalibratieproces helpt om te controleren of de apparatuur de juiste volumes afgeeft, zodat deze kan worden hersteld als dat niet het geval is.

Deel een van de twee:
De kalibratie controleren

  1. 1 Verzamel de benodigde materialen. Om de kalibratie van een pipet te controleren, hebt u de pipet, pipetpunten, gedestilleerd water, een bekerglas, een thermometer, een weegschaal en weegboten nodig. Het evenwicht moet specifiek zijn voor microgram om micropipetten te kalibreren met een maximum van 1 μL.[1]
    • U heeft niet meer dan 5 ml water nodig. Vul de beker met het water.
    • Zorg ervoor dat de pipetpunten de juiste tips zijn die op de juiste manier op de pipet passen.
  2. 2 Meet de temperatuur van het gedestilleerde water. Plaats de thermometer in het water en laat deze minstens een minuut staan. Als de rode lijn op de thermometer nog steeds beweegt, laat u deze nog een minuut staan. Noteer na een minuut de temperatuur in een notebook. Verwijder de thermometer en droog hem af wanneer u klaar bent.[2]
    • Het kennen van de temperatuur van het water is belangrijk voor de berekeningen die zullen worden uitgevoerd om de kalibratie te controleren.
  3. 3 Plaats de weegboot op de balans en maak deze nul. Idealiter gebruik je een balans met deuren en een geïsoleerde kamer. Plaats de weegboot in de kamer en sluit de deuren. Als u geen deuren heeft, plaatst u de weegboot gewoon op de balans. Druk op de knop "Nul" of "Tarra" en wacht tot het saldo nul aangeeft.[3]
    • Door de schaal op nul te zetten, wordt het gewicht van de plastic boot afgetrokken en kunt u precies het gewicht meten van wat u in de boot steekt.
  4. 4 Bereid de pipet voor op kalibratie. Veeg de pipet af met ethanol om eventuele verontreinigingen te doden voordat u begint en zorg ervoor dat niets het uiteinde van de pipet verstopt. Plaats de juiste tip aan het einde en stel het volume in dat u wilt testen.[4]
    • Voor kalibratie, test u zowel het kleinste volume als het grootste volume dat de pipet kan afgeven.[5]
  5. 5 Spoel de tip voor het kalibreren voor. Druk op de knop tot de eerste stop en plak de tip in het gedestilleerde water, zodat ongeveer 2 mm in de vloeistof wordt ondergedompeld. Laat de knop los om wat vloeistof op te zuigen en doseer de vloeistof opnieuw door de knop naar beneden te drukken. Herhaal dit drie keer om de tip voor te spoelen.[6]
    • Druk op de knop tot de tweede stop om eventuele vloeistof in de tip af te geven en de pipet uit het water te verwijderen.
  6. 6 Zuig het kalibratievolume in. Met de tip uit de vloeistof drukt u de knop tot de eerste stop in. Plaats ongeveer 2 mm van de punt in het gedestilleerde water en laat de knop los om de vloeistof in de punt te zuigen. Wacht ongeveer 1 seconde voordat u de punt uit het water verwijdert.[7]
    • Zorg ervoor dat de punt volledig is ondergedompeld tijdens het hele afzuigproces. U wilt geen luchtbellen in de tip of de resultaten zullen verkeerd zijn.
  7. 7 Breng de vloeistof in de weegboot op de weegschaal. Plaats de punt tegen de onderkant van de weegboot en druk de knop naar beneden naar de eerste stop. Ga naar een andere plek iets weg van het water en druk op de knop tot de tweede stop. Houd de knop ingedrukt en til de tip weg van de weegboot.[8]
    • Houd de tip op de pipet, want u gebruikt deze opnieuw om meer kalibratietests af te wegen. Zorg ervoor dat de punt niets aanraakt.
  8. 8 Noteer het gewicht op de balans. Sluit de deur als u een kamersaldo gebruikt. Wacht tot de nummers niet meer veranderen. Noteer dit nummer in uw notitieblok.[9]
    • Het is belangrijk om te wachten totdat het nummer is gestabiliseerd voordat je het opneemt. Uw metingen zijn onjuist als u niet wacht.
  9. 9 Herhaal dit proces om ten minste 10 metingen te doen. Zet de schaal op nul, spoel de tip voor, zuig hetzelfde volume op, doseer het volume en registreer vervolgens het gewicht. U wilt meerdere opnames van hetzelfde volume en dan kunt u ze allemaal bij elkaar optellen.[10]
    • U kunt hetzelfde proces herhalen met verschillende volumes, zolang u meerdere metingen per volume uitvoert.

Deel twee van twee:
De resultaten berekenen

  1. 1 Definieer de formule voor het berekende volume. De formule voor het berekenen van het volume dat door de pipet wordt afgegeven, is V = w * Z, waarbij w het gewicht van het water is, Z de conversiefactor op basis van de dichtheid van het water en V het berekende volume van hoeveel water is uitgegeven .
    • U kunt de Z-variabele vinden door de dichtheid van water op te zoeken aan de hand van de temperatuur die aan het begin van het experiment is genoteerd.[11]
    • Bijvoorbeeld: als de temperatuur van het water 23 ° C was, gebruikt u een Z-waarde van 1,0035 μg / mg.
  2. 2 Gemiddeld de replicaties samen. U moet het volume water dat door de pipet wordt afgegeven, minimaal 10 keer hebben gewogen. Als u al deze waarden samen wilt gemiddelde, voegt u ze allemaal toe en deelt u ze door 10. Als u meer of minder onderzoeken hebt uitgevoerd, telt u elke proef op en deelt u deze door het totale aantal onderzoeken.
    • Bijvoorbeeld: de tien gewichten die u hebt genoteerd voor een pipetvolume van 10μL zijn als volgt: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 en 9.98.
    • Het gemiddelde is: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99,84 / 10 = 9,994
  3. 3 Steek de variabelen in de vergelijking en los het op. Nadat u de juiste nummers voor elke variabele hebt bepaald, kunt u deze in de vergelijking aansluiten en het berekende volume oplossen. Om op te lossen, vermenigvuldigt u eenvoudig het gemiddelde gewicht van alle proeven met de Z-waarde.
    • Bijvoorbeeld: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
  4. 4 Bereken de nauwkeurigheid van de pipet. Om de nauwkeurigheid te berekenen, kunt u de vergelijking A = 100 x V gebruikenavg/ V0, waarbij A de nauwkeurigheid van de pipet is, Vavg is het gemiddelde berekende volume en V0 is de waarde die u in de pipet hebt ingesteld om af te geven. De nauwkeurigheid moet tussen 99-101% zijn.[12]
    • Als de pipet correct is gekalibreerd, moet de berekende waarde zeer dicht bij de werkelijke waarde liggen die u op de pipet hebt ingesteld.
    • Bijvoorbeeld: A = 100 x Vavg/ V0 = 100 x 10.019 / 10 = 100 x 1.0019 = 100.19%
    • Deze specifieke pipet is correct gekalibreerd.
  5. 5 Verzend de pipet voor kalibratie, indien nodig. Als uw pipet de kalibratietest niet doorstaat, stop hem dan onmiddellijk voor experimenten. Pipetten zijn zeer delicate en dure stukken laboratoriumapparatuur. U kunt de kalibratie niet zelf repareren, dus u moet ze opsturen voor correct onderhoud. Een alternatief is dat sommige bedrijven naar uw lab komen en uw pipetten daar kalibreren.[13]
    • Neem contact op met het bedrijf dat uw specifieke merk pipet maakt voor onderhoud.