Er zijn veel manieren om de groei van bacteriën te meten en sommige zijn complexer dan andere. Hoewel u enige consistentie in uw metingen opoffert, zijn de eenvoudigste methoden nauwkeurig genoeg en worden ze vaak gebruikt. De meest bekende methoden zijn het observeren en tellen van de bacteriën, het meten van natte of droge massa en het meten van troebelheid. Het laboratorium van uw school moet over de apparatuur en benodigdheden beschikken om ten minste één van deze experimenten uit te voeren.[1]

Methode één van de drie:
Bacteriën rechtstreeks waarnemen

  1. 1 Verzamel je materialen. Er zijn een paar speciale tools die je zou moeten hebben naast wat er in de meeste biologielaboratoria is opgeslagen. Als je je instrumenten en containers van tevoren hebt, kun je het experiment voltooien zonder naar de kast te hoeven rennen. Het is belangrijk om te weten wat elk stuk van voren zal worden gebruikt. U zou ook een aantal basisvoorwaarden moeten kennen.
    • Krijg een telkamer. Deze gereedschappen zijn voorzien van een kamer, schuif en microscoop, zodat ze eenvoudig kunnen worden opgesteld en gebruikt. Je kunt ze kopen bij leveranciers van laboratoria en klaslokalen. Ze bevatten instructies die u door het hele proces leiden. [2]
    • Pak een schenkplaat of een spreidingsplaat. Dit zijn de containers waarin je de bacteriën zult zien.
    • Cultuur is de term die wordt gebruikt om een ​​organisme te beschrijven dat kunstmatig is gekweekt voor een experiment.
    • Bouillon is een vloeibaar medium waarin de cultuur groeit.
  2. 2 Gebruik uw gietplaat of spreidplaat. Je kunt de bacteriën ook direct op een plaat plaatsen om ze onder een microscoop te bekijken. Breng de cultuur aan op de plaat en plaats deze onder een microscoop. Observeer hoeveel bacteriecellen er zijn.
  3. 3 Zorg ervoor dat je de juiste concentratie hebt. Als er te veel bacteriën zijn, overlappen ze elkaar en krijg je geen nauwkeurige telling. Verdun de cultuur door hem te mengen met meer bouillon. Als er te weinig zijn, hebt u niet genoeg voor een juist aantal. Filter de bouillon met behulp van een filtersysteem, of voeg meer van de cultuur toe als u deze voor u beschikbaar heeft.
  4. 4 Tel de bacteriën. De laatste stap is het fysiek tellen van hen. Kijk door het vergrootglas op de telkamer en noteer hoeveel u ziet. Vergelijk dit met andere tests.

Methode twee van drie:
Het meten van natte en droge massa

  1. 1 Zorg dat je de juiste apparatuur hebt. Het gaat om het gebruik van dure apparatuur en dit is tijdrovend. Tenzij uw lab de juiste apparatuur heeft, kunt u een andere methode proberen. Als je het echter wel kunt, geeft het meten van de natte en droge massa je meer consistente waarden. Je zal nodig hebben:[3]
    • Hydraulische zwaartekracht convectieoven
    • Aluminium weegpan
    • Set van kolven
    • Centrifuge of een filtratiesysteem voor laboratoria
  2. 2 Zorg ervoor dat je cultuur in een fles zit. Zo niet, giet het in één. Het moet in dit stadium in bouillon zijn, hoewel het later weer zal worden gescheiden.
  3. 3 Droog een aluminium weegpan in uw laboratoriumoven. Een alternatief is een celluloseacetaatfiltermembraan met een diameter van 47 mm, een poriegrootte van 0,45 μm.[4] Wat u ook gebruikt, weeg het voordat u het droogt, zodat u weet hoeveel u aftrekt van uw meting als u de bacteriecellen erop hebt staan.
  4. 4 Roer de fles waarin je je kweek zet, zodat deze gelijkmatig wordt gemengd. De cellen zinken vanzelf door de zwaartekracht. Roer ze uit om ervoor te zorgen dat ze gelijkmatig in de fles worden verdeeld. Op deze manier krijg je een meer representatieve steekproef.
  5. 5 Gebruik een centrifuge om de bacteriecellen van de bouillon te scheiden. Deze tool draait de kolf en een contragewicht snel, waardoor de bouillon wordt leeggemaakt en de kweek wordt verlaten. Raadpleeg deze handleiding voor een meer gedetailleerde beschrijving van het proces.
  6. 6 Schrap de pasta en plaats deze op de weegpan. Gooi de bouillon weg. Je hebt het niet meer nodig, maar je hebt de fles nodig, dus houd hem vast.
  7. 7 Spoel de centrifuge schoon en giet het spoelwater in de pan. Voeg de kolf met spoelwater toe aan de bacteriecellen. Dit geeft je nat gewicht.
  8. 8 Zoek het droge gewicht. Om het drooggewicht te meten, plaatst u de pan in de oven en droogt u hem gedurende 6 tot 24 uur op 100ºC volgens de instructies van uw specifieke oven en / of weegpan. Zorg ervoor dat je deze temperatuur niet overschrijdt, zodat de bacteriën niet verbranden. Weeg de bacteriën af nadat het droogproces is voltooid en vergeet niet om het gewicht van de weegpan af te trekken om het droge gewicht te krijgen.[5]

Methode drie van drie:
Troebelheid meten

  1. 1 Haal de benodigde apparatuur. U hebt een lichtbron en een spectrofotometer nodig. Deze zijn verkrijgbaar in winkels voor wetenschapslaboratoria. De spectrofotometer heeft instructies voor het juiste gebruik van het model dat u hebt gekocht. Deze apparatuur is goedkoop en gemakkelijk te gebruiken, dus dit is een van de meer gebruikelijke methoden voor het meten van bacteriegroei.[6]
  2. 2 Laat het licht door het monster schijnen. In de termen van de leek is troebelheid hoe troebel je monster is. U zou een troebelheidswaarde moeten krijgen, die wordt gemeten in NTU (Nephelometric Turbidity Units). Uw spectrofotometer kan enige kalibratie vereisen voordat u de troebelheid van uw monster nauwkeurig kunt meten. Raadpleeg daarom vóór gebruik de referentiehandleiding van de fabrikant.
  3. 3 Maak wat aantekeningen. Troebelheid komt overeen met de hoeveelheid bacteriën in het monster. De spectrofotometer vertelt u ook het percentage transmissie (% T). Dit aantal zal hoger zijn als de troebelheid lager is. Vergelijk uw aantallen van verschillende tests om de bacteriegroei te meten.